当前配备显微摄影装置的显微镜，其照明设施与整个光路几乎都是按照柯勒照明法的要求设计生产的，操作程序比较简单也易于掌握，调整程序如下：
    1）首先将待检切片置于载物台，用4×或10×物镜调准焦点，目的是确定载物台的位置（此步很重要，必须先行，否则影响柯勒照明的正确调整；
    2）再将台下聚光镜的孔径光阑与视场光阑收缩到zui小位置。如果聚光镜设有附加锥光透镜，应将此透镜移入光路；
    3）用台下聚光镜的升降旋钮，上下移动聚光镜，使视场光阑的影像清晰地呈现在标本平面上；
    4）旋转台下聚光镜上的两个定心旋钮，将视场光阑的影像调整到视野中心位置处—光学合轴；
    5）需要特别注意的是：在光学合轴之前，必须先进行显微镜机械轴的合轴调整，认真检查物镜、聚光镜安装定位是否正确；
    6）调整视场光阑和孔径光阑到适当位置。
    用柯勒照明观察标本时，在视野内见不到灯丝的影像，所以整个视野内亮度非常均匀，温度也低不会损坏标本。而均匀的照明是显微摄影时重要条件之一。缺点是视野内亮度较临界照明弱一些。
    柯勒照明也有一些常见的问题，以下为解决方案：
    1）我们曾见到一些使用显微镜的部门，从未按柯勒照明法的要求照明系统，甚至在没有光学合轴的情况下，就进行显微摄影。结果因为视野内的亮度明显不均匀，所拍摄的相片整个画面的密度也深浅不一。应按上述步骤认真调整，这是显微摄影必须掌握的基本操作技术。
    2）柯勒照明调整好后，聚光镜的位置就应固定不动，不能随意升降。有人采用将聚光镜降低的方法，认为这样可增加影像的景深和反差。这种操作方法是有害的，因为它首先破坏了柯勒照明，会使视野内照明不均匀。再者，他降低了数值孔径的利用，必将降低物镜的分辨能力。以此为代价来换取影像的所谓景深和反差，是极不可取的。
    3）影像清晰差时，应查找各方面因素，绝不能降低聚光镜的方法解决：如：视场光阑与孔径光阑是否过大，应按所用物镜的要求进行调整；物镜与载玻片、盖玻片表面是否有污物，必须清洁干净；切片不符合要求，过厚、染色过淡应重新制作符合显微摄影标准的切片；物镜的光行差校正程度差，显微摄影应选用平像场复消色差物镜等。
    4）聚光镜升降钮比较靠近调焦旋钮，在调焦时经常误将聚光镜升降钮旋转，从而破坏了柯勒照明。因此特别强调，每次拍摄前都必须检验柯勒照明是否正确。检验方法很简单，只需重复（2）（3）两步操作即可。聚光镜如已移位，应再次调整。
    5）为选择拍摄部位和适当的放大倍率，需要经常转动物镜转换器，换用不同倍率的物镜。但经常发生物镜转换器转换不到位的情况，机械轴被破坏，致使光学轴无法调整。这也是不正确使用显微镜的常见现象，必然影响成像质量。只要坚持每次拍摄前检验柯勒照明，就能立即发现物镜不到位的差错，要记住机械合轴是光学合轴的基础。