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荧光免疫分析法是在荧光显微镜下,可以直接观察呈现特异性荧光的抗原抗体复合物及其存在的位置。在实际工作中,由于荧光素标记抗体检查抗原的方法较为常用,所以一般通称为荧光抗体技术。
时间分辨荧光免疫法是一种特殊的荧光免疫分析法,它是利用具有双功能基团结构的螯合剂,将镧系元素标记到抗体(或抗原)上,经免疫反应形成复合物,由于镧系元素能够散发出荧光,故分离出去未结合的成分后,利用时间分辨荧光仪即可测定荧光强度,从而推测待测物的含量。
时间分辨荧光免疫法的特点如下:
1)采用脉冲光源(每秒闪烁1000次以上的氙灯),照射样品后即短暂的熄灭;
2)以电子设备控制延缓时间,待非特异性本底荧光衰退后,再测镧系荧光;
3)镧系元素具有较长的荧光寿命,延缓测量时间,能有效地消除非特异性本底荧光(10ns)的干扰;
4)镧系螯合物的激发光与荧光发射峰之间的波长差异,有利于排除非特异性荧光干扰,提高检测特异性。